一、收到原代培養的細胞后應該有哪些注意事項?
顯微鏡下觀察細胞狀態,看是否有細胞脫落、漏液和污染等異常情況,然后仔細閱讀產品說明書,因不同品牌、不同種屬、不同類型的細胞其培養技巧存在些許差別,客戶收到細胞后,請務必仔細閱讀隨貨附贈的說明書,切記不可僅憑經驗操作。
通常,我們可以從說明書中獲取以下重要信息:
(1)細胞數目
(2)細胞增殖能力
(3)推薦培養基、培養器皿及包被液
(4)推薦接種密度
(5)復蘇、培養、傳代等操作步驟
(6)運輸、儲存及培養條件
二、原代細胞的傳代周期和傳代次數怎樣確定?
原代細胞一般是采用“倍增次數”來描述細胞生長潛能的,一次細胞倍增是指細胞總數增長為原來的2倍,一次傳代通常是指將一瓶細胞擴增至2-3瓶。由于不同物種、組織來源、細胞類型和體外培養條件等因素的影響,原代細胞“倍增次數”可能會有很大差異,所以對某些原代細胞的傳代周期和傳代次數需進行具體分析。
三、欣潤生物的原代細胞,是否需要特定的包被液包被培養瓶/皿?
欣潤生物的大多數細胞可以在不使用包被液的情況下自行貼壁。然而仍有部分細胞類型需要使用指定的包被材料。具體情況請參見說明書中相應部分的內容。
四、如何計算大鼠胰島的IEQ值?
一般情況下,直徑大小為150um 的胰島細胞 = 1 IEQ.
胰島 IEQ 對照表:
直徑大?。╱m) | IEQ值 |
50-100 | 0.17 |
101-150 | 0.67 |
151-200 | 1.7 |
201-250 | 3.5 |
251-300 | 6.3 |
301-350 | 10.4 |
351-400 | 15.8 |
>400 | 22.7 |
顯微鏡下記錄細胞大小和數量后,請按以上對照表計算,再乘以稀釋倍數就是總的IEQ值。
例如:您從3ml細胞懸液中取出50ul,觀察計數后得出:
50-100 um 有5個胰島
101-150 um 有3個胰島
151-200 um 有2個胰島
201-250 um 有4個胰島
那么總的IEQ值=60×(0.17×5+0.67×3+1.7×2+3.5×4)=1215.6 IEQ